Discusión:ADN polimerasa
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Sólo pueden utilizarse polimerasas que sean capaces de actuar a las elevadas temperaturas empleadas en la reacción. En la actualidad la mayoría de las polimerasas que se suministran comercialmente son versiones recombinantes e incluso mejoradas por ingeniería genética. Dos enzimas de uso muy extendido son la ADN polimerasa Taq proveniente de la bacteria térmica Thermus aquaticus y la Vent de la bacteria Thermococcus litoralis. Sus temperaturas óptimas de catálisis oscilan al rededor de los 72ºC, temperatura a la cual incorporan aproximadamente 100 nucleótidos por segundo, siendo estables a temperaturas incluso por encima de 92ºC. De estas dos la popularidad alcanzada por la Taq rebasa por muchos y diferentes aspectos a otras polimerasas. Esta enzima es una proteína que consta de una sola cadena polipeptídica con un peso molecular de aproximadamente 95 KDa, cuenta con actividad de exonucleasa 5´ 3´. Y su fidelidad correcta de replicación depende de la concentración del Ion Mg y de los dNTPs, así como de que haya o no desbalance en la concentración de éstos últimos. Existen otras enzimas que se usan también aparte de la Taq y la Vent, en donde se requiere actividad correctora de pruebas, proporcionando mayor fidelidad de copiado, como la Pfu o UlTma, o bien que tienen también en determinadas condiciones actividad reverso transcriptasa que les permite catalizar tanto una transcripción reversa (conversión de RNA a DNA), como la propia RCP, como en el caso de la rTth. (La Reacción en Cadena de la Polimerasa a dos décadas de su invención. RODRÍGUEZ-SÁNCHEZ I.P., BARRERA-SALDAÑA H.A. CIENCIA UANL / VOL. VII, No. 3, JULIO-SEPTIEMBRE, 2004; 323- 335.
El artículo no habla sobre la ADN polimerasa en general, se centra sólo en describir las polimeras que sirven para la técnica de la PCR
LPR 19:12 22 oct, 2004 (CEST)
